[正确答案]A
[正确率]51.91%
[解析]
[考点定位]重组DNA技术中常用的工具酶。(P429)“表23-1重组DNA技术中常用的工具酶”(A对)。[题眼解析]原核生物DNA-polⅠ是分子量109kD的单肽链,可被特异的蛋白酶水解为两个片段,即含323个氨基酸残基的小片段和含604个氨基酸残基的大片段(称Klenow片段)。Klenow片段具有5’→3’聚合活性和3’→5’核酸外切酶活性,而无5’→3’核酸外切酶活性。在DNA重组技术中,Klenow片段作为DNA聚合酶,常用于cDNA第二条链的合成和标记双链DNA3’末端(A对)。连接酶可催化DNA中相邻的5’-磷酸基和3’-羟基末端之间形成磷酸二酯键,使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接(B错)。碱性磷酸酶主要用于切除末端磷酸基(C错)。末端转移酶用于在3’-羟基末端进行同质多聚物加尾(D错)。[技巧总结]重组DNA技术中常用的工具酶:①RE:识别特异序列,切割DNA;②DNA连接酶:催化DNA中相邻的5’-磷酸基和3’-羟基末端之间形成磷酸二酯键,使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段链接;③DNA聚合酶Ⅰ:合成双链cDNA分子或片段连接;缺口平移法制作高比活性探针;DNA序列分析;填补3’-端;④Klenow片段:又名DNA聚合酶Ⅰ大片段,具有完整DNA聚合酶Ι的5’→3’聚合、3’→5’外切活性,而无5’→3’外切活性。常用与cDNA第二链合成,双链DNA3’-端标记等;⑤逆转录酶:合成cDNA;替代DNA聚合酶Ⅰ进行填补,标记或DNA序列分析;⑥多聚核苷酸激酶:催化多聚核苷酸5’-羟基末端磷酸化,或标记探针;⑦末端转移酶:在3’-羟基末端进行同质多聚物加尾;⑧碱性磷酸酶:切除末端磷酸基。
129.2008N129B原核生物中识别DNA模板转录起始点的亚基是
A.RNA聚合酶的α亚基
B.RNA聚合酶的σ因子
C.RNA聚合酶的β亚基
D.RNA聚合酶的β’亚基